現代醫學研發出器官移植的技術，但是材料卻遠不足夠，等待捐贈器官的病患大排長龍，大多數人一生都等不到。人類是動物，器官是肉做的，其他動物也是，那麼何不借其他動物的器官一用？
缺乏移植器官，借豬的一用
將其他生物的組織、器官，移植到人類身上，有個酷炫的名詞「Xenotransplantation」，翻譯作「異種器官移植」。豬是已知各種動物中，最適合作為人類器官的來源，然而要將豬的器官，如心臟移植進人體，仍有重重難關有待克服，目前還沒有成功案例。
異種器官移植至少有三大潛在問題。第一，免疫排斥。以豬舉例，儘管豬已經是最適合的移植對象，但畢竟人豬殊途；將豬的器官移植進人體後，人類免疫系統會將其視為外來者（也真的是外來者）攻打，導致手術失敗。第二，生理不相容。也就是豬的器官，無法在人體順利運轉。[1]
- 延伸閱讀：動物器官移植到人身上，異種移植可行嗎？
靠著基因改造豬與藥物控制，以上兩個問題，都已達到相當程度的改善。而最近發表在《Science》期刊的論文，則是針對另一個問題，有了令人振奮的進展。異種器官移植的第三個潛在問題是：豬病毒感染。[2]
住在基因組中的古老病毒
等等，這問題很好解決吧！假如豬帶有病毒，那麼只要讓等待供應器官的豬，從胚胎開始就養在無菌環境中，不就能避免牠們長大以後，將病毒傳染給人類嗎？
問題當然沒有這麼簡單，別誤會，這裡的「豬病毒」不是住在豬身體內的病毒，而是躲在豬的基因組中，以 DNA 序列方式存在的內源性反轉錄病毒（porcine endogenous retrovirus，縮寫為 PERV）。這些病毒就是豬本身的遺傳序列，不可能直接外加藥物消滅。
事實上，人類跟豬一樣，基因組中也存在不少這類病毒。在人類的演化歷史上，基因組不斷更替，曾有許許多多外來的轉位子（transposon）插入我們祖先的 DNA 序列，也順便引進不少病毒，後來成為基因組的一部份。（人類基因組廣義看來，共超過 40% 是由各式轉位子所引進，來自病毒的只占相對比例，很低的一小部分）
經過長期的演化淘汰，能在基因組中留存下來的病毒，都成為「內源性」的病毒，屬於跟隨細胞正常複製程序的固定成員，絕大部分時候安份守己。我們的免疫系統，除了抵抗外來的入侵者以外，另一重要任務，正是防範這些原本的病毒遺傳物質，哪時候又掙脫枷鎖，跑出來作亂。
人的基因組中，有人的內源性反轉錄病毒，我們的遺傳與免疫體系可以壓制它們。豬的基因組中也有豬的內源病毒，它們在豬的體內受豬控制，當然對豬不成問題，然而，假如把豬的器官移植給人類，豬的病毒在陌生的人體環境中，很可能成為擺脫拘束器的殺人狂魔。（反過來說，把人類器官移植給豬，應該也會發生類似的事，不過此一狀況大概沒有機會上演）
豬的內源病毒會傳染給人
怎麼解決？既然病毒就是豬基因組的一部份，不可能以外加藥物處理，那麼只能直接編輯豬的基因組，先把 PERV 序列消滅。
不過，目前仍缺乏將豬器官移植給人的資訊，豬的病毒在人體作亂，想來儘管嚴重，卻純屬假說，真的值得大費周章去改造 DNA 培養基改豬嗎？新發表的論文，首先進行了一系列實驗，證實 PERV 的病毒危機並非危言聳聽。
豬的內源性反轉錄病毒可分為三種：PERV-A、PERV-B、PERV-C，在豬的基因組中合計有 62 個之多。將源自豬的 PK15 細胞株，與來自人類的 HEK293T 細胞株一起培養，過了很多代以後，人類細胞的基因組中也能偵測到 PERV（有 A 有 B，沒有 C），而且數目隨代數增加愈來愈多，證實 PERV 確實有能力由豬的細胞向人入侵。
為了測試 PERV 在人體的轉移能力，實驗團隊接著將受到 PERV 感染的人類細胞株，與新的人類細胞株共同培養。結果是，即使從未接觸過豬的細胞，只要樣本中存在來自豬的 PERV，它仍然能傳播給新的人類細胞。
儘管以上只是非常簡單的體外測試，與免疫系統存在、複雜的人體環境大不相同，不過仍足以證明跨物種的豬病毒感染，是器官移植時不可忽視的風險。畢竟，移植時為了降低排斥反應，勢必會先用藥物抑制人體的免疫作用，這正是病毒轉移的良機。
器官移植新希望－沒有內源病毒的豬寶寶
靠著近來當紅的基因編輯工具 CRISPR-Cas9，研究團隊之前已經成功消滅過豬細胞株的 PERV 序列 [3]。不過，假如目的是器官移植，那麼就要改造豬的初級胚胎纖維母細胞（primary procine fetal fibroblast，這邊用的型號稱作 FFF3），才能培育長大後用於移植的個體。
FFF3 細胞的基因組上，共有 25 處活躍的 PERV，都是需要以 Cas9 精準打擊、根除的目標。兩款 gRNA 被用於導引 Cas9 前往攻擊，然而初步結果顯示，戰況非常慘烈；看起來，大規模同時攻擊基因組上的許多部位，會使得自我毀滅機制啟動，細胞被改造成功，然後它就死掉了。
像最後一戰（Halo）士官長般如此強悍，經歷全身改造後仍活跳跳的細胞，畢竟極為少數。為了克服此一問題，研究者調配了「雞尾酒」一起餵食細胞，也就是在基因改造同時，再加上p53 inhibitor、pifithrin alpha （PFTa）、basic fibroblast growth factor （bFGF），讓受到劇烈衝擊的細胞能繼續活著，不要想不開自殺。
修正後的作法非常成功，研究團隊終於獲得基因組不含 PERV 的乾淨 FFF3。靠著千辛萬苦後得到的細胞，如今已經培育出 15 位不會表現 PERV 的健康小豬寶寶，直到論文發表之際，最老的已長到 4 個月大。
將豬的器官移植給人，目前離那一天仍為時尚早。不過這回的基因改造豬仍是又一大突破，讓我們離目標更進一步，也讓學界有了更多信心。[4]另一方面論文也指出，採用 CRISPR-Cas9 進行基因改造的同時，搭配這回的反自殺雞尾酒配方，能十分有效地強化編輯效率，增加成功率，未來或許有很寬廣的發展空間。
參考文獻：
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Niu, D., Wei, H. J., Lin, L., George, H., Wang, T., Lee, I. H., … & Lesha, E. (2017). Inactivation of porcine endogenous retrovirus in pigs using CRISPR-Cas9. Science, 357(6357), 1303-1307.
- Yang, L., Güell, M., Niu, D., George, H., Lesha, E., Grishin, D., … & Cortazio, R. (2015). Genome-wide inactivation of porcine endogenous retroviruses (PERVs). Science, 350(6264), 1101-1104.4.
- Scientists grow bullish on pig-to-human transplants
本文亦刊載於作者部落格《盲眼的尼安德塔石匠》暨其 facebook 同名專頁。
狐禪
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